原型物種
來源
模式動物品系
實驗分組
實驗周期
建模方法
應用
模型鑒定:6周后先取股骨頭及采集腹主動脈血液,取材后采用空氣栓塞法處死空白組和模型組兔。
血液標本:各組兔取材前禁飲食24h,全麻下進行腹主動脈采血,玻璃管收集腹主動脈血,冷藏,離心,取上層血清移至EP管中,于-20℃保存備用。
股骨頭標本:腹主動脈采血后,無菌條件下取出右側股骨頭,冠狀面剖開分別置于4%多聚甲醛、電鏡固定液和液氮中保存備用。
觀察兔股骨頭外觀、質地,關節軟骨色澤和外形,用刀切感覺骨質硬度。
股骨頭超微結構:電鏡固定液處理,石蠟包埋切片,于透射電鏡下觀察股骨頭超微結構改變。
采用HE染色,于光鏡下觀察骨小梁、骨細胞、髓腔及造血細胞形態、結構和數量的變化,鑒定造模是否成功。
并于高倍鏡下任選10個視野,每個視野計數50個骨陷窩,求出空骨陷窩率。
HE染色包含取材、脫鈣、包埋、切片和染色步驟。
1. 嚴格按照試劑盒說明書操作,采用化學比色法檢測計算各組血清中ALP含量,采用氧化酶法檢測計算各組血清中TG濃度。
2. 采用Western blotting法檢測p-ERK1、p-ERK2、p-JNK和p-P38蛋白含量。
應用SPSS軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯
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